Le soluzioni saline sono comuni quando si parla di biologia cellulare o biochimica. Principalmente durante gli esperimenti, sono necessarie soluzioni saline. Due soluzioni saline comuni sono PBS e HBSS. Ci sono alcuni ingredienti e prodotti chimici usati per ottenerli. Anche se entrambi sono posti in piastre Petri con una cella, hanno ancora delle differenze.
PBS contro HBSS
La differenza tra PBS e HBSS è che la soluzione salina PBS viene utilizzata negli esperimenti di biochimica e biologia molecolare mentre l'HBSS viene utilizzato nella ricerca biologica complessiva. Anche se entrambi sono salini e aiutano a mantenere un pH neutro, sono realizzati con ingredienti diversi.
PBS sta per Phosphate Buffered Saline. È una soluzione salina tampone a base d'acqua che aiuta a mantenere un livello di pH costante in un campione. Il livello di pH di questa soluzione è di circa 7,4. Il PBS è di natura isotonica e non è tossico per la maggior parte delle cellule.
HBSS sta per Balanced Salt Solution di Hank. È una soluzione liquida o in polvere utilizzata per mantenere l'osmolalità e i livelli di pH nelle applicazioni biologiche. Sono anche responsabili del mantenimento a breve termine delle cellule al di fuori del mezzo di crescita. L'HBSS è composto da diversi elettroliti che si trovano nei compartimenti intracellulari ed extracellulari.
Tabella di confronto tra PBS e HBSS
| Parametri di confronto | PBS | HBSS |
| Sta per | Tampone fosfato salino | Soluzione salina bilanciata di Hank |
| ingredienti | NaCl, KCl, Na2HPO4, KH2PO4. | Sali inorganici, glucosio o piruvato, rosso fenolo e bicarbonato di sodio. |
| Forme | Prodotto solo in forma liquida. | Può essere preparato sia in forma liquida che in polvere. |
| Temperatura di conservazione | 15-30 gradi Celsius | 4-8 gradi centigradi. |
| Applicazioni | lavare le cellule, trasportare i tessuti, diluire le cellule e preparare i reagenti. | Colture cellulari di mammifero, mezzi di trasporto |
Cos'è PBS?
PBS sta per Phosphate Buffered Saline. È una soluzione salina tampone a base d'acqua che aiuta a mantenere un livello di pH costante in un campione. Il livello dell'acqua e le concentrazioni di ioni delle soluzioni PBS corrispondono al corpo umano, il che significa che le soluzioni PBS sono di natura isotonica.
Poiché le soluzioni PBS non sono tossiche per le cellule, hanno molte applicazioni tra cui la diluizione della sostanza e il disimpegno delle cellule agglomerate, ecc. Negli ultimi anni, le soluzioni PBS sono state molto richieste perché vengono utilizzate come alternativa al mezzo di trasporto virale per la conservazione dell'RNA virus tra cui SARS-CoV-2 o Corona Virus.
Una soluzione PBS può essere realizzata con vari metodi. Se il tampone viene utilizzato su tessuto vivo, la preparazione necessita di cloruro di potassio o cloruro di magnesio, mentre se il tampone viene utilizzato su tessuto fisso, non sono necessari né cloruro di potassio né cloruro di magnesio. Durante la preparazione, il livello di pH può essere regolato utilizzando acido cloridrico o idrossido di sodio.
Gli ingredienti più comuni di una soluzione PBS includono NaCl, KCl, Na2HPO4e KH2PO4 in importi calcolati con precisione. Le soluzioni PBS possono anche essere preparate utilizzando compresse o capsule tampone PBS prodotte in commercio. Le soluzioni di PBS vengono conservate a temperatura ambiente o in frigorifero.
Cos'è l'HBSS?
HBSS sta per Balanced Salt Solution di Hank. Questa soluzione prende il nome dal biologo John H. Hanks che le ha formulate nel 1940. Questa soluzione viene utilizzata come sistema tampone nella coltura cellulare e aiuta a mantenere i livelli di pH ottimali o la crescita cellulare. I valori di pH ottimali vanno da 7,0 a 7,4.
Poiché le soluzioni HBBS contengono glucosio e bicarbonato di sodio, vengono utilizzate per il mantenimento delle cellule a breve termine al di fuori del mezzo di crescita. Queste soluzioni sono utilizzate anche per una varietà di applicazioni di coltura cellulare come il lavaggio delle cellule, il trasporto di cellule o la diluizione delle cellule. Le soluzioni di HBSS formate con calcio e magnesio vengono utilizzate come mezzi di trasporto o per la preparazione dei reagenti.
Una soluzione di HBSS viene preparata da un terreno di base in polvere combinato con acqua tissutale di qualità da coltura. Gli ingredienti comuni di una soluzione di HBSS sono sali inorganici, glucosio o piruvato, rosso fenolo e bicarbonato di sodio. Dopo la preparazione, i campioni di soluzioni HBSS vengono testati per confermare l'assenza di contaminazione batterica o fungina
Le soluzioni HBSS sono delicate e vengono fornite in flaconi sterili irradiati con raggi gamma. Le soluzioni HBSS vengono conservate a una bassa temperatura di 4-8 gradi centigradi e al riparo dalla luce diretta. Sono anche più pericolosi da realizzare rispetto alle soluzioni PBS perché le cellule umane hanno materiali a rischio biologico.
Principali differenze tra PBS e HBSS
Conclusione
Sia il PBS che l'HBSS sono soluzioni saline utilizzate principalmente nella biologia molecolare, negli esperimenti biochimici e per la ricerca sui farmaci biologici. Durante lo svolgimento di un esperimento, entrambe le soluzioni vengono poste in una capsula di Petri con una cellula o un tessuto. La soluzione trattiene le cellule durante l'esame o per l'uso durante l'esperimento. Anche se le due sono soluzioni saline separate, possono anche essere utilizzate in modo intercambiabile in condizioni favorevoli. Tuttavia, in tali casi, se il campione è necessario in forma in polvere, la soluzione HBSS viene prelevata poiché la soluzione PBS è solo in forma liquida.
Il PBS è per lo più preferito per essere preparato in laboratorio poiché la composizione degli ingredienti può essere variata se necessario ed è anche sicuro farlo poiché la soluzione di PBS non influisce negativamente sulle cellule. La soluzione HBSS invece è preferita direttamente dai mercati in quanto è pericoloso prepararla in laboratorio vista la sua delicatezza e la possibile contaminazione da batteri o funghi. Inoltre, il raggiungimento di condizioni favorevoli richiede maggiori risorse in quanto può essere conservato solo a bassa temperatura.
Sebbene lo scopo di base di entrambe queste soluzioni saline sia lo stesso, le richieste di PBS sono aumentate negli ultimi anni in quanto può essere utilizzato come mezzo di trasporto virale per la conservazione di virus a RNA incluso il Corona Virus.
